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非氧化性杀菌灭藻剂不是以氧化作用杀死微生物，而是以致毒作用于微生物的特殊部位，因而，它不受水中还原物质的影响。非氧化性杀菌灭藻剂通常是氯酚类、季铵盐类的非氧化性化合物。非氧化性杀菌灭藻剂的杀生作用有一定的持久性，对沉积物或黏泥有渗透、剥离作用，受硫化氢、氨等还原物质的影响较小，受水中PH值影响较小。但处理费用相对氧化性杀菌灭藻剂较高，容易引起环境污染，水中的微生物易产生抗药剂型。
常见非氧化性杀菌剂有以下几种：JC-412 十二烷基苄基季铵盐（1427）、JC-411 十二烷基二甲基苄基氯化铵（1427）、JC-402 高效杀菌剂（异塞脞磷酮）、双氯酚、二氧氰基甲烷等。
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