REAGEN™沙门氏菌酶联免疫反应检测试盒
RNB92001
1．概述
REAGEN™沙门氏菌酶联免疫盒是用来检测食品和饲料中沙门氏菌的含量。沙门氏菌是肠杆菌家族的一种革兰氏阴性菌，作为一种食品传播疾病的传染源，在家禽、肉、鸡蛋中可发现沙门氏菌。通常沙门氏菌可导致沙门氏菌病，检测食品中沙门氏菌既费力又费时。
REAGEN™沙门氏菌酶联免疫盒为国家管理部门、食品生产商、质检部门提供了方便有效的方法，检测水平为105细胞/ml。
2．沙门氏菌盒原理
该试剂盒基于酶联免疫检测原理，沙门氏菌的单克隆抗体包被在微孔内。分析过程中，如果样品中有沙门氏菌存在，当加入样品时，即可与单抗结合，在孔中加入适当的培养液可以快速增菌。酶标记的二抗与板孔中包被的一抗结合，加入底物后颜色的深浅与样品中沙门氏菌含量相关。
3. 沙门氏菌盒组成
抗体包被的酶标板(Salmonella antibody-coated Plate) 12X8孔
1×阴性对照（1×Salmonella Negative Control） 1×1ml
1×阳性对照（1×Salmonella Positive Control） 1×1ml
HRP- 二抗(HRP-Conjugated Antibody #2) 3×50ml
二抗稀释液(Antibody #2 Diluent) 1×20ml
20×浓缩洗液(Wash solution) 1×30mL
终止液(Stop Buffer) 1×20mL
TMB底物(TMB Substrate) 1×10mL
本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过3个月不使用试剂盒，请将阴性对照、阳性对照、二抗保存于-20°C。
4. 沙门氏菌检测检测限：105细胞/ml
5.交叉反应：本试剂盒可检测沙门氏菌A、B、C、D、E血清型。
6．其他需要而本试剂盒未提的设备或材料
ü 酶标仪（450nm）
ü 恒温培养箱
ü 漩涡振荡器
ü 移液器(10、20和100mL，1mL各一支)
ü 多道移液枪：50-300ul（可选择）
ü mGN培养基：包含10ug/ml新生霉素的GN培养基，可从市场上购买或按以下配方自制：
革兰氏阴性培养基（GN 培养基或Hajna GN培养基，pH7.0±0.2）
胰蛋白(Tryptose) 20.0g
葡萄糖(Dextrose) 1.0g
D-甘露醇(D-Mannitol) 2.0g
柠檬酸钠(Sodium citrate) 5.0g
脱氧胆酸钠(Sodium desoxycholate) 0.5g
磷酸氢二钾(Dipotassium phosphate) 4.0g
磷酸二氢钾(Monopotassium phosphate) 1.5g
NaCl(Sodium chloride) 5.0g
去离子水(Distilled water) 1.0L
（将上述成分溶解在水中，121°C高温灭菌15min，避免过度加热。）
ü 高压灭菌锅
ü 500ml培养瓶
ü 增菌培养基
ü 检测培养基
ü 去离子水
7.沙门氏菌检测注意事项
实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。
ü 样品中含有沙门氏菌，请小心使用。
ü 进行样品准备过程中，操作人员必须有好的微生物操作技能。
ü 不要使用过期的试剂盒。
ü 不同批次的试剂盒不要混用，确保二抗正确稀释。
ü 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
ü 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。
ü 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。
ü 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。
ü 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。
ü 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。
沙门氏菌检测
