对于荷叶中黄酮类化合物,天谱仪器采用高效液相色谱法,准确测定黄酮类化合物含量,下面以槲皮素为例。
以下是利用LC-10Tvp高效液相色谱仪对荷叶中槲皮素进行的HPLC检测方案
1、仪器与试剂
1.1仪器、设备 LC-10Tvp高效液相色谱仪
Vertex 色谱柱:250mm×4.6mm×5μm 分析天平
水浴回流装置
针头过滤器
微孔滤膜:0.45µm
1.2试剂 甲醇(HPLC)
乙腈(HPLC)
磷酸(AR)
盐酸(AR)
2、供试品溶液和对照品溶液的制备
对照品溶液的制备 取槲皮素对照品适量,精密称定,加甲醇制成合适浓度的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取干燥荷叶适量,研成细粉。取本品粉末(过6号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入醇100ml,水浴回流90min,回收甲醇,残渣精密加入甲醇-5%盐酸(4:1)的混合液10ml,准确称定质量,水浴回流30min,放冷,再称定质量,用甲醇补足减失的量,摇匀,过滤,取续滤液,过0.45um滤膜,即得。
3、色谱条件
色谱柱:C18, 4. 6 mmx250 mm,粒度5 µm
流动相:以乙腈-0.4%磷酸=35:65
波长:360nm
柱温:25℃
流速:1. 0 mL/min
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