植物组织培养所需基本设备
一、灭菌设备
1.高压蒸汽灭菌器,主要用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。按结构可分为大型卧式、中型立式、小型手握式等不同类型;按控制灭菌压力、温度和时间的方式可分为手动控制、半自动和全自动,其中由微电脑控制的全自动高压蒸汽灭菌器的使用越来越普遍。
2.烘箱,一般用于玻璃器皿和接种器械的灭菌消毒,也可用于干燥玻璃器皿
3.紫外灯,用于空气和环境的表面灭菌
4.微孔滤膜过滤器,主要用于在高温灭菌条件下容易分解并丧失活性的生长调节剂和有机附加物等的杀菌
5.酒精灯和电热灭菌器,主要用于接种器械的灭菌,常用的电热灭菌器有玻璃珠灭菌器和红外线灭菌器
二、接种设备
1.超净工作台
2.接种工具,包括解剖显微镜、镊子(小型尖头,枪型)、剪刀(大、小解剖剪,弯头剪)、解剖刀、接种真和接种环、酒精灯和灭菌器
3.封口材料,包括棉塞、纱布或牛皮纸、皮筋或线绳、透明聚丙烯塑料膜、封口膜、耐高温的塑料纸、塑料盖
三、培养设备
1.培养器皿,包括试管、三角瓶、培养皿、果酱瓶等
2.培养设备,包括固定式培养架、旋转式培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱
3.环境调控设备,包括节能日光灯、定时器、空调、加湿器和去湿机
四、检测设备
1.组织切片设备 切片机,磨刀机,烤片机,染缸
2.显微观察设备 (1)双目体式显微镜,用于剥离茎尖以及在瓶外观察培养物生长分化情况 (2)倒置显微镜,可从培养器皿的底部观察培养物,也可用于液体培养材料的观察 (3)相差显微镜,可以观察到细胞中透明物的微结构及凹凸面 (4)干涉显微镜,可以测定各种细胞结构的光程差,据此测定细胞和组织的干重 (5)电子显微镜,可进行更精细结构的观察 (6)血球计数板,用于测定单位体积培养液中的细胞数目。
五、驯化设备 1.驯化容器,一般使用营养钵和穴盘 2.移植床,用于摆放驯化容器 3.移栽基质,一般可选用珍珠岩、蛭石、砂子等 4.迷雾装置,用于驯化初期对培养苗的喷雾补水,规模较小可用喷壶 5.遮阳网















组培设备组培设备与条件
开展植物组织培养工作需要一个比较合理实用的场所,一套适宜的设备和提供必要的实验环境条件,这是首先要考虑到的。根据科学、合理的原则,一个较为理想的配置应该包括:
1、化学药品室
2、配培养基室
3、灭菌室
4、接种室
5、无菌培养室
基本仪器设备与用品
1、仪器设备
超净工作台、高压灭菌锅(手提式、立式或卧式)、小推车(可选)、精密电子天平(至少千分之一)、电子天平或托盘天平、酸度计、普通冰箱、烘箱、解剖镜、光照培养箱(选购)、电炉、微量可调移液器及配套吸嘴、移液管架、磁力搅拌器(可选)、不锈钢托盘、灌装机(可选)、培养架、定时器(控制光照时间)、紫外线杀菌灯、照度计(可选)、温湿度计(可选)蒸馏水器、摇床(可选)、针头滤器及配套滤膜
2、小型用品
枪镊,弯剪、解剖刀、接种盘
3、玻璃器皿
组培瓶(玻璃或塑料)、烧杯、量筒、移液管、试剂瓶、移液管架、容量瓶、试管、酒精、玻璃棒、滴瓶
4、组培药品 (详细药品请见常用配方)
5、其他
吸耳球、刷子、记号笔、定时钟、手套、封口膜、卫生药棉、拖鞋、口罩、白大褂、滤纸、洗瓶
培养条件
在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件,培养基组成、 PH值、渗透压等各种化学环境条件都回影响组织培养育苗的生长和发育。
培养基的配制
配制培养基有两种方法可以选择,一是购买培养基中所有化学药品,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如 MS、B5等。
自己配制可以节约费用,但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题,给实验带来麻烦。就目前国内的情况看,大部分还是自己配制。为了方便起见,现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。