二氧化碳培养箱的灭菌技术
二氧化碳培养箱是在普通培养的基础上加以改进,主要是能加入CO2,以满足培养微生物所需的环境。主要用于组织培养和一些特殊微生物的培养。二氧化碳培养箱广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养,常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。
二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
在生物活体内,生物体有自身的免疫系统保护细胞或组织,但是在体外培养时,没有任何保护自己的免疫屏障。对于二氧化碳培养箱的基本参数温度、CO2和湿度,大多数培养箱都能满足研究实验的需要。然而,针对培养过程中面临的各种污染源,各品牌二氧培养箱的控制方式和效果不尽相同,因此细胞体外培养中zui大的威胁实际上是污染问题。
对于细胞来说,非常理想的培养环境同样也适合这些污染物的生存,培养箱本身是不会辨别的,而细胞培养中大部分时间里细胞都是位于培养箱内,因此箱体内能否抑菌或灭菌非常关键!
二氧化碳培养箱中的主要污染源:细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原体、非同种细胞。
支原体:支原体污染后,因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存,培养基一般不发生浑浊,细胞无明显变化,外观上给人以正常感觉,实则细胞已经受到多方面潜在影响,如引起细胞变形,影响DNA合成,抑制细胞生长等,往往被大多数实验者忽视。
细菌:细菌污染后,培养基1-2天就会变色,对细胞生长影响明显,应迅速将污染细胞与其它细胞系隔离,灭菌后丢弃,还要用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台。
病毒:由于病毒寄生生存,爆发后尽快和正常细胞隔离,丢弃处理,相对来说容易处理,对操作者威胁较大;尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了;目前没有好的抑制方法,包括现在常用的两性霉素,一旦污染容易反复爆发,尤其孢子很难杀灭。
非同种细胞:即细胞交叉污染,由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,往往会使一种细胞被另一种细胞污染。目前,世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染,致使许多实验宣告无效。
产品说明:
川一仪器二氧化碳培养箱是细胞、组织、细菌培养的一种实验仪器。是开展免疫学、肿瘤学、遗传工程学及生物工程所必须的关键设备,广泛应用于微生物、农业科学、药物学的研究和生产。
主要特征:
●二氧化碳培养箱采用流线型圆弧设计,外壳采用冷轧钢板制造,表面静电喷塑;内胆均为优质不锈钢材料制成,半圆形四角设计使清洁更方便。
●微电脑温度控制器,温度波动小,箱内装有紫外线杀菌灯可定期对箱内进行紫外线消毒,从而更有防止细胞培养期间污染。
●双层门结构:外门开启后,透过由高强度钢化玻璃制作成的内门观察工作室实验情况,温度、湿度不受影响。
●CO2浓度传感器采用芬兰原装进口红外探头,能直接显示箱内CO2浓度,运行可靠。
●独立设置的门加热系统,能有效避免内门玻璃上的接露现象。
●工作室内采用水盘自然蒸发加湿,湿度由仪表直接显示。
●二氧化碳培养箱设有独立限温报警系统,超过限制温度即自动中断,保证实验安全运行,不发生意外。
二氧化碳培养箱的选购
使用者对二氧化碳培养箱的选购关心的当然就是其可靠性、污染物的控制和使用方便。
CO2培养箱主要控制模拟活体内环境相关的
3个基本变量:稳定的
CO2水平、温度、相对湿度。要有稳定的培养环境,就要考虑这三方面的影响因素,选购时,就应该对这些“重中之重”有一定的了解才能选到适合自己的仪器。但是,其它的一些方面的“小”因素也不能忽略,因为这些都会影响仪器的使用价值和寿命。选购时,就应该从各方面的因素加以考虑
温度控制:
保持培养箱内恒定的温度是维持细胞健康生长的重要因素。当选购二氧化碳培养箱时,有两种类型的加热结构可供选择:气套式加热和水套式加热。虽然这两种加热系统都是和可靠的,但是它们都有着各自的优点和缺点。水套式培养箱是通过一个独立的热水间隔间包围内部的箱体来维持温度恒定的。热水通过自然对流在箱体内循环流动,热量通过辐射传递到箱体内部从而保持了温度的恒定。独特的水套式设计有其优点:水是一种很好的绝热物质,当遇到断电的时候,水套式系统就能更可靠地长久保持培养箱内的温度准确性和稳定性(维持温度恒定的时间是气套式系统的4-5倍)。如果您的实验环境不太稳定(如有用电限制,或者经常停电)并需要保持长时间稳定的培养条件,此时,水套式设计的二氧化碳培养箱就是您好的选择。而气套式加热系统是通过箱体内的加热器直接对箱内气体进行加热的。气套式设计在箱门频繁开关引起的温度经常性改变的情况下能够迅速恢复箱体内的温度稳定。因此,气套式与水套式相比,具有加热快,温度的恢复比水套式培养箱迅速的特点,特别有利于短期培养以及需要箱门频繁开关的培养。此外,对于使用者来说气套式设计比水套式更简单化(水套式需要对水箱进行加水、清空和清洗,并要经常监控水箱运作的情况)。在购买气套式培养箱时,要注意的是:为了不影响培养,培养箱还应该有一个风扇以保证箱内空气的流通和循环,此装置还有助于箱内温度、CO2和相对湿度的迅速恢复。