凡用环氧乙烷灭菌的一次性注射器等器材的灭菌效果检测方法有生物指示剂检测和环氧乙烷化学灭指示卡两种方法。

　　环氧乙烷灭菌效果的生物指示剂为国际标准菌株枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）

 特性：

　　该菌为G兰氏阳性杆菌，极易形成芽孢，芽孢位于菌体中央，不膨大。芽孢染色为孔雀绿着色。在琼脂平皿菌落呈棕色并随培养时间延长菌落有黑色素生成着色。

　　生物指示剂（ATCC9372）：　　　染菌量：5×105－106cfu/片

　　抗力：流通蒸气：100℃4min
　　　　　环氧乙烷：600±30mg/L T：54℃　　　相对湿度60%±10%
　　　　　　　　　　存活时间≥7.8min　　　　 死亡时间58min
　　　　　　　　　　D值为2.6－5.8min

 使用方法：

　　用于环氧乙烷（包括微波、干热）灭菌检测时，将生物指示剂（成品已制成标准芽孢片，并装于灭菌低袋内）按设计放于消毒物品包内中心部位，经灭菌作用时间完成后，在无菌室内用眼科镊子在酒精灯火焰上烧红后，将菌片接种于普通肉汤管内，于37℃下培养24h，观察记录结果。如肉汤管清亮、无混浊，表示无菌生长，（－）阴性，为灭菌后接种操作过程中污染其他菌时，可在无菌室内用白金耳在无菌琼脂平皿上划线分离，于37℃下培养24h，后观察菌予以识别，必要时可进行涂片染色镜检鉴别。每次消毒效果试验时，应设2片未经灭菌处理的对照芽孢片。即在进行经灭菌处理的菌片接种后同时将两片未经灭菌处理的对照芽孢片接种于肉汤管中，于同条件下培养，观察结果，（+）阳性，对照成立。

 营养肉汤培养基处方：

　　牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，溶于1000ml蒸镏水中，完全溶解后用试管分装（5ml/管），压力蒸汽灭菌后备用。

 注意事项：

　　1、本生物指示剂应保存在4℃冰箱内，避免其它因素影响。
　　2、本生物指示剂在检验时可按“消毒技术规范”有关规定进行。