74134RNeasyPlusMiniKit（50）从细胞和组织中纯化总RNA的详细资料：
　　性能
　　RNeasyPlusMini操作流程可从细胞和组织中纯化得到重复高产的RNA，并高效去除基因组DNA污染，用于敏感的下游应用（参见EffectivecellgenomicDNAremoval、EffectivetissuegenomicDNAremoval、High,reproducibleRNAyields和Array-readyRNA）。通常从培养细胞中可获得AgilentRIN值接近10的总RNA。
　　原理
　　细胞和易裂解组织首先在含有异硫氰酸胍的高变性BufferRLTPlus中裂解和匀质化，该缓冲液能使RNases立即失活，以保证分离到完整的RNA。裂解液再流过gDNAEliminator柱。该离心柱与高盐缓冲液共同作用，可选择性高效的去除基因组DNA。加入乙醇以提供RNA结合的合适条件，样本再加入到RNeasyMini离心柱。含有硅胶膜的特制离心柱能特异性的结合裂解细胞中的RNA。
　　操作流程
　　可从多达107个细胞或30mg组织中纯化总RNA。简洁的工作流程可在25分钟内纯化得到已去除基因组DNA的RNA（参见RNeasyPlusprocedure）。样本首先被裂解和匀质化。裂解液流过gDNAEliminator柱，在流过gDNAEliminator柱的溶液中加入乙醇，样本再加上样到RNeasyMini离心柱。RNA结合到膜上，污染物被洗去。获得高品质RNA，洗脱体积30μl或更大。
　　处理不同的起始样本可用不同的实验方案。实验方案的不同之处主要在于样本的裂解和匀质化。样本上样到gDNAEliminator柱之后的步骤就类似。此操作流程适合富集mRNA，不包括大部分小于200nt的RNAs（如rRNAs和tRNAs）。RNeasyPlus操作流程稍作修改后可从培养细胞中纯化含miRNA等小RNAs的总RNA。
　　使用BufferRLTPlus（RNeasyPlusMiniKit提供）进行组织破碎和匀质化时，可能会产生过多泡沫。在破碎和匀浆前向BufferRLTPlus中加入ReagentDX（单独提供）可充分减少泡沫产生。ReagentDX经仔细检测，表明配合此试剂盒使用不会影响RNA的纯度或下游应用。更多相关信息，请见：-Products-18474822/