测序仪注意事项

  北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年，是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司，我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。如测序仪、合成仪、扩增仪、蛋白纯化仪、自动工作站和气相色谱质谱联用仪等，公司尤其在 ABI 各种型号的基因分析仪方面有丰富的维修维护经验。

1．abi prism 310基因分析仪是专业精密仪器，需专人操作、管理和维护。2．本实验测序pcr反应的总体积是5μl，而且未加矿物油覆盖，所以pcr管盖的密封性很重要，除加完试剂后盖紧pcr管盖外，选用pe公司的pcr管。如pcr结束后pcr液小于4～4.5μl，则此pcr反应可能失败，不必进行纯化和上样。3．作为测序用户来说，只需提供纯化好的dna样品和引物，一个测序pcr反应使用的模板不同，需要的dna量也就不同，pcr测序所需模板的量较少，一般pcr产物需30～90ng，单链dna需50～100ng，双链dna需200～500ng，dna的纯度一般是a260nm/a280nm为 1.6～2.0，用去离子水或三蒸水溶解dna，不用te缓冲液溶解。引物用去离子水或三蒸水配成3.2pmol/μl较好。4．本实验使用的测序试剂盒是bigdye荧光标记终止底物循环测序试剂盒，一般可测dna长度为650bp左右。本仪器dna测序准确度为 (98.5±0.5) %，仪器不能辨读的碱基n<2%，所需测定的长度超过了650bp，则需设计另外的引物。为保证测序更为准确，可设计反向引物对同一模板进行测序，相互印证。对于n碱基可进行人工核对，有时可以辨读出来。为提高测序的准确度，根据星号提示位置，可人工分析该处图谱，对该处碱基作进一步核对

北京拓普塞斯生物专注测序仪销售与维修服务，主营产品型号：有373测序仪、377测序仪、310测序仪、3700测序仪和3100测序仪型等dna测序仪。欢迎您致电联系我们获取更多优惠~~~

3130和3130xl测序仪系统组成

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系统组成

美国应用生物系统公司 3130 和 3130xl 基因分析仪由以下组件组成：

? 毛细管电泳仪

? 计算机工作站：用于仪器控制和数据分析

? 软件：用于仪器控制、数据收集和样品文件自动分析

? 分析软件包括：

- 用于碱基识别的序列分析软件

- 用于微卫星、SNP、AFLP 和 LOH 分析的 GeneMapper?/GeneMapper? ID 软件

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测序仪之醋酸钠/乙醇法纯化pcr产物

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(1) 将混合物离心，将扩增产物转移到1.5ml ep管中。(2) 加入25μl醋酸钠/乙醇混合液，充分振荡，置冰上10min以沉淀dna。12 000r/min于4℃离心30 min，小心弃上清。(3) 加70%(v/v)的乙醇50μl洗涤沉淀2次。12 000r/min于4℃离心5min，小心弃上清和管壁的液珠，真空干燥沉淀10～15min。电泳前测序pcr产物的处理(1) 加入12μl的tsr于离心管中，剧烈振荡，让其充分溶解dna沉淀，稍离心。(2) 将溶液转移至盖体分离的0.2ml pcr管中，稍离心。(3) 在pcr仪上进行热变性(95℃ 2min)，冰中骤冷，待上机。

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