南京科捷食品分析仪/农药厂检测用LC600B等度高效液相色谱仪，产品参数：

简单的来了解一下咖啡因吧？

首先要明白一点，茶叶中都含有咖啡因，只是量多与量少的关系 干茶叶中含２％～４％，咖啡因愈是好茶含量愈多。

咖啡因是在1820年，从咖啡中发现含有咖啡因的存在；至于茶叶中也含有咖啡因，则是1827年的事了。茶叶几乎是在发芽的同时，就已开始形成咖啡因，从发芽到第一次采摘时，所采下的第一片和第二片叶子所含咖啡因的量最高；相对地，发芽较晚的叶子，咖啡因的含量也会依序减少。咖啡因可以使大脑的兴奋作用旺盛；除此之外，还有盐基、茶碱，也都含有强心、利尿的作用。茶叶中咖啡因的保健作用显著。

我们为什么要检测茶叶中的咖啡因呢？
茶叶中咖啡因的含量是衡量茶叶质量的重要指标之一，也具有多种药理活性，咖啡因又名咖啡碱，属甲基黄嘌呤化合物，具有提神醒脑等刺激中枢神经的作用。
对于茶叶中咖啡因含量测定的常用方法有紫外分光光谱法，高效液相色谱法。茶叶中的成分较多，色谱法具有分离和检测双重功能，用色谱法更好。目前茶叶中咖啡因含量的测定采用反相高效液相色谱法较普遍。本实验采用紫外检测器，水提取茶叶中的咖啡碱，用0.45的滤膜过滤，用 0.2%H3PO4：CH3OH(80:20)流动相，检测波长276nm，用咖啡因对照品的保留时间进行定性， 用外标法定量。

检测咖啡因的仪器有：
紫外分光光度计
高效液相色谱仪

如何进行试验呢？
准备好检测仪器；
LC-600B高效液相色谱仪

自动进样系统和紫外检测器；
型超声波清洗器；
0.45?m的水系滤膜和有机滤膜；
离心机。
100mL的容量瓶。

对照品工作溶液为：
咖啡碱标样，乙醇；磷酸；纯净水；甲醇；茶叶样品

茶叶样品的处理
准确称取茶叶样品1 g（0.0001 g）于100 mL容量瓶
加入约70mL纯净水
在超声波中超声20min，平行3份，定容至100mL
0.45?m的水系滤膜抽滤，取续滤液与比色管（或者用5000转/min以上的离心机离心15min，取上清液），待用

色谱条件（实验时自己记录）：
色谱柱： 流动相体系：0.2%磷酸–甲醇（体积比为 80 : 20） (注意：在做样品时用梯度洗涤，咖啡因出峰后用100% CH3OH冲洗7-8min的柱子
再用0.2%磷酸–甲醇（体积比为 80 : 20）平衡7-8min柱子才能进下一样品)
流速：1.000 mL/min
柱温：30.0 oC 进样量：5 μL
检测波长：276 nm