一、细胞基本属性

细胞名称：人胚肾细胞

细胞别称：293 [HEK-293]; Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

细胞货号：SNL-014
细胞种属：人
生长情况：贴壁
培养条件：H-DMEM+10%FBS+1%双抗
培养环境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期：2-3天
培养基体积：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例：1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法：
1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项：不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手建议)或92%完全培养基+8%DMSO(高手建议);
冻存规格：200-300万/ml，1ml每管
冻存方法：
1. 离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2. 将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3. 将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
Tips：
1.细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间；
2.T25瓶细胞发货易漂浮成团，收货若成团按收货处理规定进行；
3.细胞培养时可能会有部分黑点，属正常现象，具体原因参见培养操作说明2、3条；


我们建议使用尚恩生物293 [HEK-293]（人胚肾细胞）专用完全培养基（产品货号：SNLM-014）作为体外培养293 [HEK-293]（人胚肾细胞）的培养基。