转让二手高效液相色谱仪 岛津2030plus型 2019年产

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高效液相色谱仪（HPLC）作为物质成分分析的核心设备，其操作的规范性直接影响检测结果的准确性与可靠性。无论是食品检测还是环境监测，遵循标准化操作流程都是获得准确数据的前提。以下从样品准备到仪器关机的全流程，详解高效液相色谱仪的规范操作要点。

一、开机前的准备工作

实验开始前需完成三项核心准备：样品预处理、流动相配制与仪器状态检查。样品需根据检测需求进行预处理，如果汁样品需经 0.22μm 滤膜过滤，去除颗粒物以防堵塞色谱柱；固体样品则需用合适溶剂溶解并定容，确保浓度在仪器检测范围内。流动相配制需严格遵循方法要求，如水相需用超纯水制备，有机相需选择色谱纯级别，混合流动相需充分摇匀并超声脱气 20-30 分钟，避免气泡进入泵体导致压力波动。

仪器检查重点包括：确认溶剂瓶内流动相充足，吸滤头无堵塞（可将吸滤头浸入纯水中，挤压管路观察气泡吸入情况）；色谱柱型号与方向正确（反相柱需注意 “inlet” 和 “outlet” 标识）；检测器流通池无气泡，废液瓶已清空。对于配备自动进样器的仪器，需检查样品瓶密封、液面达标，避免进样时出现吸空。

二、开机与系统平衡

开机需按 “检测器→泵→工作站” 的顺序启动，待仪器自检完成后进入参数设置。在工作站中输入检测方法参数：流动相比例、流速（通常 0.8-1.0mL/min）、柱温（常设 30-40℃）、检测波长及运行时间。参数设置完成后，先以低流速（0.2-0.5mL/min）启动泵，让流动相缓慢进入系统，10 分钟后逐渐升至目标流速，避免瞬间高压冲击色谱柱。

系统平衡是关键环节，需持续监测基线与柱压。当泵压波动小于 5%、基线漂移低于 0.01mAU/min 时，视为系统平衡完成。对于梯度洗脱实验，需额外运行 1-2 次空白梯度，确保系统内残留物质被冲洗干净，避免干扰样品检测。平衡时间因流动相组成而异，纯有机相系统约 30 分钟，含缓冲盐的系统需 60-90 分钟，必要时可通过进样空白溶液验证平衡状态。

三、样品测定与数据记录

样品测定前需进行进样针校准，手动进样时用样品溶液润洗针筒 3-5 次，排除气泡后抽取超过定量环体积 3 倍的样品（如 20μL 定量环需抽取 60μL 以上），推针至定量环充满后切换进样阀，完成进样。自动进样器则需提前设置进样体积（如 10μL），并运行洗针程序，防止样品交叉污染。

样品运行过程中需实时监控色谱图，观察峰形对称、分离度达标（相邻峰分离度应≥1.5）。若出现峰拖尾或分叉，可能是色谱柱污染，需用纯溶剂冲洗；若保留时间漂移，需检查柱温稳定或流动相变质。每批样品测定时，需穿插标准品溶液，用于计算校正因子，保证定量准确性。数据记录需包含保留时间、峰面积、分离度等关键参数，原始图谱需存档备份。

四、关机与仪器维护

样品检测完成后，需按 “冲洗系统→停泵→关机” 的流程操作。若流动相含缓冲盐，必须先用 10%-20% 有机相水溶液冲洗系统 60 分钟以上，彻底去除管路与色谱柱中的盐残留，防止结晶堵塞。

仪器维护需同步进行：色谱柱拆下后用堵头密封，存于对应保存液中；进样针用蒸馏水冲洗后放回专用盒；清理样品室残留废液，用无尘布擦拭自动进样器导轨；记录仪器使用日志，注明运行时间、柱压变化及异常情况，为后续维护提供依据。

五、注意事项与应急处理

操作中需避免的风险：流动相混用（如乙腈与水混合时需缓慢搅拌，防止放热暴沸）、超量程进样（单次进样体积不超过定量环体积的 50%）、突然断电（需立即关闭仪器电源，待供电恢复后重新平衡系统）。若遇泵压骤升，应立即停泵，依次检查管路、过滤器、色谱柱，找到堵塞点后用适当溶剂反向冲洗；若检测器无信号，需检查氘灯寿命或流通池漏液，及时更换耗材。

遵循这套标准化操作流程，不仅能保证高效液相色谱仪的检测精度，更能延长仪器使用寿命，降低故障概率。在实际操作中，需结合具体样品特性与仪器型号灵活调整参数，通过反复验证优化方法，实现从样品到数据的准确转化，为科研与生产提供可靠的分析支持。