TNF-α试剂盒使用包被有人TNF-α特异性抗体的96孔酶标板，标准品和样品被加入到孔中，样品中存在的TNF-α通过固相的抗体与孔结合。洗涤后加入生物素化的抗人TNF-α抗体。 洗去未结合的生物素化抗体后，将HRP-标记的链霉素加入到到孔中。 再次洗涤板孔，向孔中加入TMB底物溶液，底物显色与所结合的TNF-α量成比例。 加入终止液颜色从蓝变为黄，并且在450nm处测量颜色的吸光度值。
TNF-α试剂盒组成成分：
组分
表述
TNF-a酶标板（项目A）
12*8=96孔，包被有抗人TNF-a抗体
浓缩洗涤液（20x）（项目B）
20x浓缩溶液 25ml
标准蛋白（项目C）
2瓶人类TNF-α。1个小瓶就够配制每个一式两份的标准品。
检测抗体TNF-α（项目F）
2瓶生物素化的抗人TNF-α。
每个小瓶足以测定微板的一半。
浓缩HRP-链霉亲和素（项目G）
200μl600X浓缩HRP缀合链霉亲和素
一步法TMB底物（项目H）
TMB溶液
终止液（项目I）
8ml 0.2M硫酸
测定稀释剂A（项目D）
30ml稀释缓冲液
测定稀释剂B（项目E）
15ml 5X浓缩液
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