ColProof®细胞 RNA 快速提取试剂盒
Col-R0102

试剂盒应用

本试剂盒采用裂解液 CP 在 10 分钟内完成细胞的裂解、提取和纯化。无需使用蛋白酶 K、无需

低温离心。该配方中含有 RNA 保护剂，能够抑制 RNA 降解、保护 RNA 完整，从而提高 RNA 产量。

提取 RNA 可用于 RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文库构建等。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等领域。

使用方法

1. 样本准备

1.1 悬浮细胞 1,000rpm 离心 5 分钟，收集细胞沉淀。

或贴壁细胞用胰酶消化细胞后 1,000rpm 离心 5 分钟，收集细胞沉淀。

1.2 细胞数量<5×10 6个时，加入 500μL 裂解液 CP。细胞数量为 5×10 6~1×10 7个时，加入 700μL 裂解

液 CP。轻轻吹打混匀，55℃孵育 1 分钟。

1.3 12,000rpm 离心 1 分钟。

1.4 细胞数量<5×10 6个时，取 450μL 上清。细胞数量为 5×10 6~1×10 7个时，取 650μL 上清。

1.5 加入 0.5 倍体积无水乙醇，充分混匀。按照步骤 2.1-2.7 操作。

2. RNA 纯化

2.1 全部加入 RNA 吸附柱中，12,000rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中废液。

2.2 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 CPW，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉收集管中废液。

2.3 重复步骤 2.2 一次。

2.5 12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉收集管中废液。

2.6 将 RNA 吸附柱放入新 1.5mL 无 DNase 无 RNase 离心管中，加入 30-50μL 洗脱液 C，室温放置 1分钟。

2.7 12,000rpm 离心 2 分钟，得到 RNA 溶液，-80℃保存。

注意事项

1. 务必在超净台中进行操作，常换手套，防止 RNA 降解。

2. 尽可能使用新鲜样本进行 RNA 提取。

3. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管，防止 RNA 降解，常更换吸头，防止交叉污染。

4. 为了提高洗脱效率，可提前将洗脱液 C 置于 65℃水浴后再使用。

5. 根据后续试验需求，请使用 DNase I（货号 QR0102）进行基因组清除。