ColProof®植物 RNA 快速提取试剂盒(多糖多酚类)
Col-R0202
试剂盒应用
本试剂盒采用专门针对多糖多酚类植物开发的裂解液 PP,在 10 分钟内完成植物叶片、根、茎、花蕊、种子等的裂解、提取和纯化。提取对象包括棉花、马铃薯、铁皮石斛等。整个提取无需使用蛋白酶 K 等酶类制剂。该配方中含有 RNA 保护剂,能够抑制 RNA 降解、保护 RNA 完整,从而提高产量。提取 RNA 可用于 RT-PCR、RT-qPCR Northern Blot、分子克隆、文库构建等。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
使用方法
1. 20-100mg 新鲜样本经过液氮研磨后,加入 700μL 裂解液 PP 和 35μLβ-****,涡旋 30 秒。
2. 55℃孵育 1 分钟。
备注:淀粉含量高的样本无须加热可直接进行步骤 3。
3. 12,000rpm 离心 1 分钟,取 500μL 上清液。
4. 加入 250μL ****,上下颠倒混匀。
5. 全部加入 RNA 吸附柱中,12,000rpm 离心 1 分钟,倒掉收集管中废液。
6. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 PWA,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
7. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 PWB,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
8. 重复步骤 7 一次。
9. 12,000rpm 离心 2 分钟,倒掉收集管中废液。
10. 将 RNA 吸附柱放入新 1.5mL 无 RNase 离心管,加入 30-50μL 洗脱液 P,室温放置 1 分钟。
11. 12,000rpm 离心 2 分钟,得到 RNA 溶液,-80℃保存。
注意事项
1. 务必在超净台中进行操作,常换手套,防止 RNA 降解。
2. 尽可能使用新鲜样本进行 RNA 提取。
3. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管,防止 RNA 降解,常更换吸头,防止交叉污染。
4. 为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液 P 置于 65℃水浴后再使用。
5. 根据后续试验需求,请使用 DNase I(货号 QR0102)进行基因组清除。
10分钟内从多糖多酚植物组织中提取总RNA