ColProof®血液RNA快速提取试剂盒
Col-R0301
试剂盒应用
本试剂盒采用特殊裂解液 B 从新鲜全血、抗凝血、血凝块中提取并纯化 RNA。整个过程仅需要 10分钟。采用硅基材质吸附柱,高效专一吸附 RNA,保证提取高纯度、高产量 RNA。该裂解液配方中含有 RNA 保护剂,能够抑制 RNA 降解、保护 RNA 完整,从而提高 RNA 产量。提取 RNA 可用于 RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、分子克隆、文库构建等。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
使用方法
1. 300μL 血液(不足 300μL,无菌 PBS 补齐)中加入 500μL 裂解液 B 和 10μL 蛋白酶 K,颠倒混匀。
2. 55℃孵育 2 分钟。
备注:如果 RNA 提取量比较低,可延长孵育时间至 10 分钟。
3. 12,000rpm 离心 30 秒。取 750μL 上清。
4. 加入 0.5 倍体积****,上下颠倒混匀,
5. 全部加入 RNA 吸附柱中,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
6. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 BW1,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
7. 向 RNA 吸附柱中加入 500μL 洗涤液 BW2,12,000rpm 离心 30 秒,倒掉收集管中废液。
8. 重复步骤 7 一次。
9. 12,000rpm 离心 2 分钟,倒掉收集管中废液。
10. 将 RNA 吸附柱放入新 1.5mL 无 DNase 无 RNase 离心管中,加入 30-50μL 洗脱液 B,室温放置 1
分钟。
11. 12,000rpm 离心 2 分钟,得到 RNA 溶液,-80℃保存。
注意事项
1. 务必在超净台中进行操作,常换手套,防止 RNA 降解。
2. 尽可能使用新鲜样本进行 RNA 提取。
3. 使用无 DNase 无 RNase 的吸头和离心管,防止 RNA 降解,常更换吸头,防止交叉污染。
4. 为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液 B 置于 65℃水浴后再使用。
5. 根据后续试验需求,请使用 DNase I(货号 QR0102)进行基因组清除。
10分钟内从300uL全血、抗凝血中提取总RNA